부산대학교 도서관

형질전환 닭을 생산하는데 있어서 필수적인 유전자 전이 방법은 retrovirus 또는 lentivirus vector system을 이용하여 X기의 배반엽 세포에 외래 유전자를 전이시키는 방법이 가장 널리 이용되고 있다. 그러나 최근의 형질전환 닭의 생산에 관한 몇몇의 연구 보고 에서 도입된 virus vector 내의 일부 서열이 결손된 것으로 확인되었으며, 결손된 부위의 유전자 서열은 포유류를 대상으로 한 연구에서 보고된 이소성의 splicing donor 부분과는 상관관계가 없는 다른 염기 서열이 해당되는 것으로 보고되었다. 본 연구에서는 고양이 면역결핍 바이러스(feline immunodeficiency virus, FIV) 유래의 FIV-Ov23p-hEPOW lentivirus vector를 이용하여 난관 조직 특이적으로 hEPO 유전자가 발현되는 형질전환 닭을 생산하였으며, 이로부터 유래한 G1 세대 형질전환 개체에서 닭의 genome에 도입된 lentivirus vector 서열의 결손을 발견하였다. Virus vector 서열의 결손은 Southern blotting, genomic DNA PCR 분석 및 DNA sequencing을 실시하여 확인하였다. 그 결과, 도입된 lentivirus 서열 중 2.3 kb 크기의 ovalbumin promoter 내의 estrogen response element (ERE) 부분에서 443 bp가 결손된 것을 확인할 수 있었으며, 앞서 보고된 여러 연구 결 과와 마찬가지로 특정 서열과는 상관관계가 없는 부분이 소실된 것으로 확인되었다. 그 러나 promoter 부분의 결손에서 불구하고 G1 형질전환 닭이 산란한 계란에는 최대 371 IU/mL (3.1 μg/mL) hEPO 단백질이 생산되었으며, 혈액에서는 22.5 mIU/mL (0.19 ng/ mL)의 hEPO가 포함되어 있었다. 즉, enhancer로 알려진 ERE의 일부 결손이 난관 조직 을 통한 단백질의 발현량을 크게 증가시키진 못하였으나 난관 조직 특이적 발현에는 영 향이 없는 것으로 나타났다. 이상의 연구 결과는 FIV 유래의 lentivirus vector system을 이용하여 생산한 형질전환 닭에서 도입되는 vector 서열의 결손에 대한 실례를 제공하는 것으로, 결손이 일어나지 않는 새로운 형태의 virus vector system의 개발을 모색할 필요 성을 제시하는 데에 의의가 있다.