부산대학교 도서관

싸이토카인은 세균, 바이러스, 균류 같은 병원체에 대항하기 위한 면역반응에서 필수적인 조정자이다. 그러나 싸이토카인의 불균형은 류마티스 관절염, 염증성 장질환, 건선 같은 다양한 자가면역 질환 발생에서 중요한 요인이다. 인터루킨-32는 최근에 연구된 염증성 싸이토카인이다. 인터루킨-32는 단핵구와 대식세포를 자극하여 NF-κB와 p38 mitogen-activated protein (MAP) kinase 경로의 활성화를 통해 중요한 염증 싸이토카인(IL-1β, IL-6 and TNFα)과 케모카인 (IL-8과 MIP-2)를 유도한다. 인터루킨-32의 생물학적 활성은 Mycobacterium tuberculosis, influenza A virus, and human immunodeficiency virus (HIV) 같은 전염성 병원체 발생과 관련이 있다. 인터루킨-32는 여섯 종류 (α, β, γ, δ, ε, ζ)가 있고, 이중에서 IL-32γ가 가장 활성이 높다. 그러나 환자의 생물학적 샘플에서 IL-32 종류를 구별하는 항체가 없어서 특정 IL-32 발현 정도와 여러 질환과의 관련성을 확인하는 것은 불확실 했다. 그러므로 우리는 인간의 유전자를 대장균 넣어서 발현시킨 재조합 IL-32γ 단백질을 사용하여 특이성을 갖는 단일클론 항체를 개발하여 특성을 확인했다. 이렇게 만든 IL-32γ에 특이성을 가진 단일클론 항체는 세포 배양액에 IL-32와 IL-32γ를 이식 시킨 마우스 혈청에 IL-32γ를 인식한다. 이러한 새롭게 개발된 IL-32γ에 대한 특이성을 가진 단일클론 항체는 immunoblotting, FACS분석, 면역형광염색, 면역침강, ELISA 같은 면역학적 실험에 유용한 도구가 된다. 단일클론 항체는 면역 반응과 자가면역 질환에서 IL-32의 중요한 기능을 연구하는데 도움을 줄 것이다.
Cytokines are essential coordinators of defensive immune responses for resolving the invasion of pathogens such as bacteria, virus and fungi. However, dysregulated cytokines are the main cause of various autoinflammatory immune disorders such as rheumatoid arthritis, inflammatory bowel disease, and psoriasis. Interleukin-32 (IL-32) is a recently described cytokine and characterized as a proinflammatory cytokine. IL-32 stimulates monocytes and macrophages to induce important proinflammatory cytokines (IL-1β, IL-6 and TNFα) and chemokines (IL-8 and MIP-2) through activating the NF-κB and p38 mitogen-activated protein (MAP) kinase pathways. The biological activities of IL-32 are associated with epidemic pathogens, Mycobacterium tuberculosis, influenza A virus, and human immunodeficiency virus (HIV). IL-32 is transcribed as six alternative splice variants (α, β, γ, δ, ε, and ζ) with IL-32γ being the most active isoform. However, it is unclear which isoform is related to specific disease activities since there are no high quality antibodies available to distinguish IL-32 isoforms in biological sample of patients. Therefore we developed specific anti-human IL-32γ monoclonal antibodies by using recombinant human IL-32γ which was expressed in E.coli. The IL-32γ specific monoclonal antibodies recognized endogenous IL-32 in cell culture supernatants and in serum of IL-32γ transgenic mice. The newly developed IL-32γ monoclonal antibodies can be a useful tool for immunoblotting, FACS analysis, immunofluorescent staining, immunoprecipitation and ELISA. These monoclonal antibodies will be helpful in investigating the precise function of IL-32 in immune responses and in autoinflammatory diseases.