학술논문
Simplified direct Kjeldahl method suitable as a primary reference procedure for the determination of total protein in reference materials used in clinical chemistryZjednodušená Kjeldahlova metoda vhodná jako primární referenční metoda pro stanovení celkové sérové bílkoviny v referenčních materiálech užívaných v klinické chemii
Document Type
TEXT
Author
Source
Subject
Language
Czech
Multiple languages
Multiple languages
Abstract
Chromý a kol. v r. 2009 zjistili, že stanovení celkové sérové bílkoviny biuretovým činidlem za použití albuminových kalibrátorů, vypracované v r. 1981 Doumasovou pracovní skupinou jako kandidáta na referenční metodu, poskytuje výsledky s neakceptovatelnou systematickou pozitivní chybou, způsobenou zejména endogenním sérovým bilirubinem a lipidy. Zjistili též, že k nápravě stačí užít bíkovinné standardy na bázi séra nebo plasmy, které jsou komutabilní se vzorky pacientů, a jsou certifikovány Kjeldahlovou metodou. V našich dvou předchozích publikacích, (Chromý a kol., 2015 a Vinklárková a kol., 2015), jsme ověřili Kjeldahlovy postupy užívané v laboratorní medicíně. Zvolili jsme přímou analýzu ze sraženiny bílkovin promyté kyselinou trichloroctovou a prověřili jsme její analytické provozní parametry. V této práci popisujeme zjednodušenou analýzu s modifikovanou Kjeldahlovou digesční baňkou, kterou lze přímo připojit k tomu přizpůsobené Parnes-Wagnerově destilační aparatuře a uvádíme její validační parametry. Zjednodušenou Kjeldahlovu metodu navrhujeme jako standardní operační postup pro stanovení celkové bílkoviny v referenčních materiálech užívaných v klinické chemii.
Chromý et al. found in 2009, that albumin-calibrated analysis of serum total protein with biuret reagent according to a candidate reference method developed by Doumas working group in 1981, provide results with unacceptable positive bias, caused namely by endogeneous serum bilirubin and lipids. They also found, that a simplest way to rectify this defect, is the use of serum and/or plasma-based protein standards, commutable with patients samples, which are certified by the Kjeldahl method. In our foregoing two articles, (Chromý et al., 2015, and Vinklárková et al., 2015), we reviewed Kjeldahl methods adopted by laboratory medicine, selected a direct analysis on washed protein precipitates with trichloroacetic acid and verified its preliminary analytical performance parameters. In this article, we describe a simplified Kjeldahl analysis with modified digestion flask, now directly connectable to accordingly adapted Parnas and Wagner distillation unit, and present its re-validation. Simplified Kjeldahl method is suggested as a standard operating procedure for total protein in reference materials used in clinical chemistry.
Vinklárková B., Chromý V., Bittová M., Šprongl L., Žaludová L.
Literatura
Chromý et al. found in 2009, that albumin-calibrated analysis of serum total protein with biuret reagent according to a candidate reference method developed by Doumas working group in 1981, provide results with unacceptable positive bias, caused namely by endogeneous serum bilirubin and lipids. They also found, that a simplest way to rectify this defect, is the use of serum and/or plasma-based protein standards, commutable with patients samples, which are certified by the Kjeldahl method. In our foregoing two articles, (Chromý et al., 2015, and Vinklárková et al., 2015), we reviewed Kjeldahl methods adopted by laboratory medicine, selected a direct analysis on washed protein precipitates with trichloroacetic acid and verified its preliminary analytical performance parameters. In this article, we describe a simplified Kjeldahl analysis with modified digestion flask, now directly connectable to accordingly adapted Parnas and Wagner distillation unit, and present its re-validation. Simplified Kjeldahl method is suggested as a standard operating procedure for total protein in reference materials used in clinical chemistry.
Vinklárková B., Chromý V., Bittová M., Šprongl L., Žaludová L.
Literatura