학술논문

PCR em tempo real para detecção do vírus da doença de Aujeszky
Document Type
article
Source
Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Vol 65, Iss 3, Pp 801-808 (2013)
Subject
suínos
qPCR
validação
doença de Aujeszky
Animal culture
SF1-1100
Language
English
Portuguese
ISSN
1678-4162
0102-0935
Abstract
O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma PCR em tempo real (qPCR) para o diagnóstico rápido e sensível da doença de Aujeszky. Os iniciadores amplificaram um fragmento de 123 pares de base do gene codificante da glicoproteína D. A qPCR foi testada em 25 amostras de cérebro de suíno positivas e 85 amostras negativas para DA no isolamento viral e na soroneutralização. A sensibilidade analítica foi calculada com acréscimo de um isolado brasileiro do SuHV-1 titulado em amostras de cérebro de suíno negativas na soroneutralização e na PCR. A técnica apresentou sensibilidade analítica de 10-0,5 TCID50/50µL. A qPCR foi capaz de distinguir reações inespecíficas devido a dímero de oligonucleotídeos iniciadores ou amplificações, além do alvo designado (evitando, assim, os falso-positivos), e de obter resultados rápidos.