학술논문
激光诱导荧光结合磁分离检测CP4-EPSPS基因 / Magnetic Separation Combined with Laser Induced Fluorescence for Detection of CP4-EPSPS Gene
Document Type
Academic Journal
Author
Source
食品科学 / Food Science. 42(16):218-223
Subject
Language
Chinese
ISSN
1002-6630
Abstract
建立一种激光诱导荧光结合磁分离的检测技术,用于在线检测CP4-5-烯醇丙酮酸酯-3-磷酸合酶基因(CP4-5-enol acetate-3-phosphate synthase gene,CP4-EPSPS).以氨基磁纳米粒子(magnetic nanoparticles,MNPs)为载体修饰cDNA,构建捕获基因探针,并设计FAM荧光标记的信号基因探针(sDNA).在目的 基因CP4-EPSPS (tDNA)存在的情况下,cDNA和sDNA通过碱基互补配对原则与tDNA结合形成双链结构.该结构通过毛细管时被磁场富集分离,然后在激光诱导荧光检测器的作用下在线检测其荧光信号.通过对MNPs质量浓度、捕获探针浓度、牛血清白蛋白质量浓度进行考察,在优化的实验条件下,在1.0×10-11～2.0×10-7 mol/L范围内,CP4-EPSPS基因浓度与荧光峰面积呈良好线性关系,检出限为4.0×10-12 mol/L (RSN=3),该方法成功应用于转基因大豆的聚合酶链式反应扩增产物的检测.