학술논문
基于Src/VEGF轴探究补肾活血汤治疗乳腺癌骨转移的作用机制 / Bushen Huoxue Decoction's mechanisms of action in treating bone metastasis of breast cancer based on Src/VEGF axis
Document Type
Academic Journal
Author
Source
湖南中医药大学学报 / Journal of Traditional Chinese Medicine University of Hunan. 43(1):59-68
Subject
Language
Chinese
ISSN
1674-070X
Abstract
目的 探讨Src/VEGF信号通路对补肾活血汤治疗乳腺癌骨转移的影响及作用机制.方法 通过TCMSP、GeneCards数据库,挖掘出补肾活血汤治疗乳腺癌骨转移的潜在靶点,并将靶点进行拓扑分析和GO、KEGG富集分析,对拓扑分析排第一的关键核心靶点进行实验验证.15只裸鼠随机分为对照组、模型组、补肾活血汤组,5只/组,模型组、补肾活血汤组通过胫骨注射人乳腺癌4T1-luc细胞构建裸鼠乳腺癌骨转移模型,补肾活血汤组按照36.67 g/(kg?d)予以补肾活血汤灌胃,对照组、模型组按照0.01 mL/(g?d)予以生理盐水灌胃,连续给药14 d.监测并记录裸鼠体重变化;HE染色法检测裸鼠骨组织病理学变化;X线、微CT检测裸鼠胫骨情况;胫骨组织Trap染色观察破骨细胞;Western blot检测裸鼠胫骨组织细胞原癌基因(Src)、血管内皮生长因子抗体(vascular endothlial growth factor,VEGF)、金属基质蛋白1(matrix metalloproteinase 1,MMP1)蛋白表达水平;免疫组化法检测裸鼠胫骨组织SRC、VEGF、MMP1、活化T细胞核因子抗体(nuclear factor of activated T-Cells 1,NFATc1)基因表达水平.结果 补肾活血汤治疗乳腺癌骨转移潜在靶点共949个,其中核心靶点15个,关键核心靶点为Src;KEGG富集分析显示,补肾活血汤可能调控197个信号通路;GO富集分析得到生物过程(biological process,BP)605个条目、细胞组成(cellular component,CC)52个条目、分子功能(molecular function,MF)117个条目.与对照组相比,模型组裸鼠体重明显减轻(P<0.01),HE染色可见大量肿瘤细胞和炎性细胞浸润,X线、微CT下观测胫骨骨破坏面积百分比显著增加(P<0.01),Trap染色可见成熟破骨细胞数量明显增加(P<0.01),胫骨组织Src、VEGF、MMP1、NFATc1表达水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,补肾活血汤组裸鼠体重明显增加(P<0.01),肿瘤细胞和炎性细胞浸润情况好转,X线、微CT下观测胫骨骨破坏面积百分比显著降低(P<0.05),成熟破骨细胞数量明显减少(P<0.05),胫骨组织SRC、VEGF、MMP1、NFATc1表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01).结论 补肾活血汤治疗乳腺癌骨转移是多成分、多靶点、多通路共同作用的结果,其可能通过下调Src/VEGF轴及其下游MMP1、NFATc1基因的表达,抑制破骨细胞活化、改善骨破坏,发挥治疗乳腺癌骨转移的作用.