학술논문

PCR仪性能对检测结果的影响 / Effect of PCR instrument performance on assay results
Document Type
Academic Journal
Source
食品安全质量检测学报 / Journal of Food Safety & Quality. 12(18):7200-7205
Subject
聚合酶链反应;温度;准确性;均一性;恒温时间
Language
Chinese
ISSN
2095-0381
Abstract
目的 评价仪器本身性能对PCR检测结果的影响.方法 使用不同厂家和不同型号的PCR仪,选取特定基因片段进行扩增实验,通过人为调整PCR仪的设定温度,探究PCR仪温度准确性,样品分别置于仪器上可能出现温度差异的位置进行扩增,探究PCR仪温度均一性,并探究恒温时间对扩增结果的影响.结果 当反应程序整体温度调高或降低1~2℃时,PCR仪检测弱阳性样本循环阈值(cycle threshold,Ct)值有极显著性差异(P<0.01).实验过程中恒温时间达不到设定要求,扩增结果会出现极显著性差异(P<0.01),甚至造成扩增失败.结论 研究结果提示实验室应通过PCR校准和检测过程的质量控制,确保检测结果的质量.