학술논문
卵巢癌顺铂敏感与耐药细胞ClC-3蛋白表达及通道功能的差异 / Difference of ClC-3 protein expression and channel function between cis-platin-sensitive and -resistant ovarian cancer cells
Document Type
Academic Journal
Author
封洁珠; 李恩泽; 彭子瀚; 裴一飞; 朱林燕; 高绿芬; FENG Jie-zhu; LI En-ze; PENG Zi-han; PEI Yi-fei; ZHU Lin-yan; GAO Lü-fen
Source
中国病理生理杂志 / Chinese Journal of Pathophysiology. 35(5):784-790
Subject
Language
Chinese
ISSN
1000-4718
Abstract
目的:从分子和细胞水平研究卵巢癌顺铂敏感(a2780)及耐药(a2780cp)细胞中ClC-3氯通道蛋白表达及通道功能的差异.方法:MTT法检测人卵巢癌a2780和a2780cp细胞对顺铂敏感性的差异;real-time PCR法检测ClC氯通道家族在a2780和a2780cp细胞中的mRNA表达;Western blot检测ClC-3蛋白的表达;免疫荧光法观察ClC-3蛋白在a2780和a2780cp细胞的分布;全细胞膜片钳技术记录细胞氯电流.结果:(1)a2780和a2780cp细胞对顺铂的敏感性存在差异,其IC50值分别为5μmol/L和20μmol/L(P<0.01);(2)对ClC氯通道家族mRNA表达的检测结果显示,a2780和a2780cp细胞主要表达ClC-3,且在a2780cp细胞中ClC-3 mRNA表达显著减少(P<0.01);(3)在蛋白水平上,与a2780细胞相比,a2780cp细胞的ClC-3蛋白表达量显著降低(P<0.01);(4)免疫荧光显示ClC-3在a2780细胞中主要分布在胞膜上,而在a2780cp细胞中则主要表达在胞质内;(5)顺铂能激活a2780细胞的氯通道,产生ClC-3介导的氯电流,但在a2780cp细胞中则不能;(6)ClC-3 siRNA处理a2780细胞后,顺铂诱导的氯电流则不再出现.结论:ClC-3氯通道在顺铂敏感和耐药的卵巢癌细胞蛋白分布、表达和功能上存在差异,可能是引起顺铂耐药的潜在机制之一.