학술논문
一种分离培养及鉴定小鼠牙龈间充质干细胞的方法 / A method for isolation, culture and identification of gingival mesenchymal stem cells from mice
Document Type
Academic Journal
Author
Source
新医学 / New Medicine. 53(5):349-354
Subject
Language
Chinese
ISSN
0253-9802
Abstract
目的 探讨建立一种新型、简便易行的小鼠牙龈间充质干细胞(GMSC)体外提取及培养方法.方法 选择C57BL/6小鼠,使用Ⅳ型胶原酶消化分离其牙龈组织,种板培养并传代.利用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8法)观察小鼠GMSC的增殖规律,流式细胞术检测小鼠GMSC的细胞表面标志物,进行成脂、成骨诱导分化实验,观察所提取GMSC的多向分化潜能.结果 CCK-8试验显示小鼠GMSC在培养第3～4日增殖活跃(第2～5日相邻时间点间,P均<0.05),第5日开始增殖进入平台期(第5～8日的相邻时间点间比较,P均>0.05).流式细胞术结果显示,与小鼠口腔黏膜上皮细胞相比,GMSC高表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105(P均<0.05),几乎不表达CD34、CD45(P均>0.05);多向分化诱导实验中,GMSC成功分化为对应的组织细胞,证实了GMSC的多向分化功能.结论 本研究成功提取小鼠GMSC,首次发现了一种新的、操作简便的、对原代细胞伤害少且有较高细胞获得率的科学提取GMSC方法,并鉴定了其细胞标志物和分化功能.