학술논문
鼻咽癌hMLH1基因甲基化及其与临床和病理特征的关系 / Methylation of hMLH1 gene in nasopharyngeal carcinoma and its relationship with clini-copathological characteristics
Document Type
Academic Journal
Author
Source
浙江实用医学 / Zhejiang Practical Medicine. 26(3):188-201
Subject
Language
Chinese
ISSN
1007-3299
Abstract
目的 通过检测hMLH1基因的表达及其启动子区甲基化呈现的状态,研究hMLH1基因同鼻咽癌临床和病理特征之间的关系,旨在找出可能作为鼻咽癌早期分子生物学诊断的标志物.方法 (1)qRT-PCR检测hMLH1基因表达水平;(2)采用NCBI检测hMLH1基因组的序列,METH-PRIMER软件分析hMLH1启动子区有无经典的CpG岛.同时在线设计MSP及BSP特异性引物;(3)使用亚硫酸氢盐修饰后测序(BSP)检测鼻咽癌和正常鼻咽上皮细胞株中hMLH1基因的甲基化状态,每株细胞3个克隆,运用甲基化特异性PCR技术检测浙江省建德市第一人民医院20例正常鼻咽上皮组织和2012年5月-2016年5月初次确诊60例鼻咽癌组织hMLH1基因启动子区甲基化状态.结果 (1)提示hMLH1在鼻咽癌细胞株和鼻咽癌组织中的相对表达量较正常鼻咽上皮细胞株和正常鼻咽上皮组织中的相对表达量明显降低.去甲基化药物5-Aza-dC处理后再次检测hMLH1的表达量,发现其在鼻咽癌细胞株中的表达量相对正常鼻咽上皮细胞株无明显降低.(2)在正常鼻咽上皮细胞株及20例正常鼻咽上皮组织中均未检测到hMLH1基因甲基化;而在5个鼻咽癌细胞株中hMLH1甲基化频率为80.0％(4/5),60例鼻咽癌组织中hMLH1甲基化频率为43.3％(26/60),两者与正常对照比较均有统计学差异(P<0.01),不同甲基化状态与临床病理特征差异无统计学意义(P>0.05).结论 hMLH1基因启动子区甲基化具有肿瘤特异性,而hMLH1基因甲基化同鼻咽癌患者病理特征无明显相关性,可作为鼻咽癌早期预测因子,有望成为鼻咽癌早期诊断的分子标志物,将来还可能作为去甲基化基因治疗的靶点.