부산대학교 도서관

An optical method using a custom-built system was investigated to study heating effects on bovine serum albumin (BSA) as affected by pH and ionic strength (IS). Changes in the optical rotation (OR) and transmitted light (TL) of BSA in 0.01 M phosphate buffer at pH 6.1, 7, and 7.9 with IS maintained at 0.04, 0.08, and 0.16 were monitored while heating the solution at ∼6°C/min from room temperature to ∼85°C. There was no significant effect of IS on BSA's denaturation temperature (Td) values. Td was affected by pH with lower values observed at pH 7.9 than at pH 7 but not statistically different from values at pH 6.1. Values at pH 6.1 and 7 were not significantly different either. These observations were consistent with literature values determined by differential scanning calorimetry. Changes in the TL signal, reflecting the formation of an opaque gel, were not detected at pH 7.9, identified only at the two highest IS at pH 7, and observed always at pH 6.1, i.e., closest to the pH value for the isoelectric point (pI) of BSA reported to be around pH 4.7 to 5.2. Promoting of gel formation by IS was attributed to the screening of intra- and intermolecular electrostatic forces.Un metodo optico basado en un sistema experimental especialmente construido para este proposito fue usado para investigar la influencia del pH y la fuerza ionica sobre los efectos termicos en la seroalbumina bovina (BSA). Los cambios en la rotacion optica (OR) y la luz transmitida (TL) de soluciones buffer de fosfato 0,01 M con 2,5% de seroalbumina bovina (BSA) a pH 6,1, 7 y 7,9 y una fuerza ionica (IS) de 0,04, 0,08 o 0,16 fueron monitoreados durante su calentamiento a ∼6°C/min desde temperatura ambiente hasta ∼85°C. No se observo un efecto estadisticamente significativo de IS sobre la temperatura de desnaturalizacion termica (Td). Td fue afectada por el pH con valores menores observados a pH 7,9 que a pH 7 pero no estadisticamente diferentes del valor a pH 6,1. Valores a pH 6,1 y 7 tampoco fueron estadisticamente diferentes entre ellos. Estas observaciones son consistentes con valores reportados en la literatura y obtenidos por el metodo de Calorimetria Diferencial de Barrido (DSC). Cambios en la senal de TL, reflejando la formacion de un gel opaco, no fueron detectados a pH 7,9, encontrados solo a los valores mayores de IS a pH 7, y observados consistentemente a pH 6,1, el valor de pH incluido en este estudio mas cercano al punto isoelectrico de BSA y reportado entre pH 4,7 y 5,2. El efecto de la IS en la mayor formacion de geles fue atribuido al su capacidad de bloquear fuerzas electrostaticas intra- e intermoleculares.Palabras clave: Propiedades opticas, seroalbumina bovina, luz transmitida