부산대학교 도서관

La pertusis o tosferina es una enfermedad respiratoria altamente contagiosa causada por la bacteria Gram negativa Bordetella pertussis. Cuestionamientos sobre la seguridad de las vacunas basadas en células completas han conducido al desarrollo de vacunas acelulares que generan reacciones adversas con menor frecuencia, pero que requieren de métodos rápidos y confiables para la detección de los antígenos vacunales, su cuantificación, o ambas. Con tal propósito, se establecieron ensayos ELISA de tipo sándwich con el uso de anticuerpos monoclonales (Mabs) para la detección de los componentes de una vacuna acelular: la toxina pertúsica detoxificada (Ptg), la pertactina 2 (Prn2) y la hemaglutinina filamentosa (FHA). El ELISA de captura contra Ptg emplea la fetuina en fase sólida, y se estableció el Mab 2G3 contra Ptg como reactivo de detección con mejores resultados. La linealidad del ensayo se mantuvo en el rango 0.78-50 ng/mL. Para el ELISA de captura de la Prn2 se obtuvo como mejor combinación la que empleó el Mab 9C6 para la captura y Mab 6B3 para la detección, con una linealidad en el rango 0.15-10 ng/mL. Para la FHA, la mejor combinación se obtuvo con el Mab 11E8 para la captura y el Mab 437 para la detección, con un rango de linealidad 3.25-200 ng/mL. Los límites de detección en las condiciones óptimas de los ensayos fueron: Ptg 0.78 ng/mL, Prn2 0.07 ng/mL y FHA 3.25 ng/mL FHA. Estos ensayos ELISA se pueden implementar eficazmente para el control de procesos durante la producción de los tres antígenos vacunales de B. pertussis. [ABSTRACT FROM AUTHOR]