학술논문
Human Granulocyte Colony Stimulating Factor (G-CSF) Produced in the Filamentous Fungus Aspergillus niger.
Document Type
Article
Author
Source
Subject
*GRANULOCYTE colony stimulating factor receptor
*CELL receptors
*CYTOKINE receptors
*ASPERGILLUS niger
*ASPERGILLUS
*
*
*
*
Language
ISSN
1318-0207
Abstract
Prvič smo opisali sistem za izražanje in izločanje medicinsko pomembne človeške beljakovine G-CSF iz glive Aspergil-lus niger. Izbrali smo zanesljiv način izražanja s fuzijo beljakovine G-CSF v skupnem bralnem okvirju za encimom glu-koamilazo, ki ga gliva v veliki količini izloča, in cepitvenim mestom KEX2. Toje omogočilo pridobitev 5-10 mg/l gojišča pravilno odcepljene beljakovine G-CSF, vendar glavnina (>90 %) ni bila biološko aktivna. Po koraku denaturacije/koncentracije in kromatografski ločbi/renaturaciji seje proliferacijska aktivnost beljakovine G-CSF znatno povečala in analiza s kovinsko-kelatno afinitetno kromatografijo je potrdila monomerno in pravilno zvito beljakovino. Ti podatki kažejo, da seje ta človeška beljakovina izločila nepravilno zvita v gojišče glive A. niger m daje ušla kontrolnemu mehanizmu pravilnega zvijanja beljakovin v endoplazemskem retikulumu. Našo ugotovitev smo obravnavali v primerjavi z zvitjem beljakovine G-CSF, proizvedene v bakterijah in kvasovkah. [ABSTRACT FROM AUTHOR]