부산대학교 도서관

Uvod: Reaktivne vrste kiseonika (ROS) nastaju u telu tokom normalnog metabolizma pomoću enzima i neenzimske hemijske redukcije molekularnog kiseonika. U slučaju bržeg formiranja ROS od njihovog eliminisanja, mogu se akumulirati visoko reaktivni slobodni radilo li i mogu izazvati višestruka oštećenja biomolekula i ćelija. Određivanje izo-prostana u biološkim matricama najčešće se koristi za reg-istrovanje oštećenja prouzrokovana slobodnim radikalima i zahteva selektivne, osetljive i posebne metode rada. Metode: Ovo istraživanje prikazuje razvoj i validaciju LC-MS/MS metode za određivanje 8-izo-prostaglandina F2a u ljudskoj plazmi pomoću modifikovanog postupka ekstrakcije tečno-tečno sa razdvajanjem faza. Rezultati: Modifikovana procedura pripreme uzoraka osigurala je veći učinak ekstrakcije, jasno odvajanje organskog sloja od vodene faze u plazmi i taloga proteina, i bolje pročišćen proizvod za instrumentalnu analizu. Linearnost je potvrđena u opsegu 0,1-5,0 pg/L sa R2 > 0,996; normal-izovana matrica varirala je između 86,0 i 108,3%, tačnost je bila u rasponu od 90,4% i 113,9%, a preciznost i u toku i između faza bila je manja od 7%. U toku radnog dana može se izvršiti propusnost od preko 50 uzoraka sa trajanjem od 10 minuta. Zaključak: Ova metoda ispunjava sve trenutne kriterijume industrijske validacije i omogućava tačno i precizno određivanje 8-izo-PGF2a u ljudskoj plazmi u dijagnostički značajnom rasponu koncentracije. [ABSTRACT FROM AUTHOR]