학술논문
芍药苷转化酶 G6046 的异源表达及酶活鉴定.
Document Type
Article
Source
Subject
Language
Chinese
ISSN
1002-5464
Abstract
芍药苷是一种在传统草药芍药中发现的糖苷类化合物，对心脑血管系统有保护作用。然而，口服芍药苷的生物利 用度较低，直接吸收的很少，极大地限制了其临床应用。已有研究表明，芍药苷的药理作用可能是由其代谢产物产生的，且主要 在肠内菌中被代谢。本文研究了芍药苷转化酶 G6046 在大肠杆菌 BL21 DE3 中的诱导表达和纯化，并通过优化诱导条件提高酶的 产量，发现在诱导表达的最佳条件（16℃，诱导 24 h）下，菌体的产酶量可达到 5.34 mg/g，产酶量提高 51.69%。基于此诱导条件， 本研究对 G6046 与芍药苷的反应条件（pH 和温度）进行优化，发现 G6046 在 pH 9.0、45℃时反应最快，酶活性最高，比酶活为 14.56 U/mg。在此优化条件下扩大反应体系，将反应规模从 G6046‑ 底物（1/1, mg/mg）扩大到 G6046‑ 底物（1/20，mg/mg），转化产 物的产量显著提升，为分离芍药苷转化产物奠定了基础。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]