학술논문

心型脂肪酸结合蛋白纯品含量的柱前衍生超高效液相色谱方法研究 / Determination of the Mass Fraction of Pure Heart-type Fatty Acid-binding Protein by Pre-column Derivatization UPLC
Document Type
Academic Journal
Source
计量学报 / Acta Metrologica Sinica. 44(7):1141-1146
Subject
计量学
心型脂肪酸结合蛋白
定量分析
柱前衍生超高效液相色谱法
同位素稀释质谱法
metrology
heart-type fatty acid-binding protein
mass fraction
pre-column derivatization ultra performance liquid chromatography
high performance liquid chromatography-isotope dilution mass spectrometry
Language
Chinese
ISSN
1000-1158
Abstract
心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)被酸水解后,以氨基酸混合溶液国家标准物质为标准,γ-氨基丁酸为内标,经柱前衍生剂处理,再采用超高效液相色谱法可测定其中天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、精氨酸4种衍生物的量,进而推算出H-FABP纯品的含量.将此方法的测定结果与同位素稀释质谱法测定H-FABP含量的结果相比较,可验证所建方法的准确性.实验显示,在最优条件下,所建立的柱前衍生超高效液相色谱(UPLC)法中H-FABP含量测定结果为0.111 3 mg/mL,相对标准偏差为2.03%,扩展不确定度为0.0027mg/mL(k=2),检出限和定量限分别为1.16×10-3 mg/mL和3.86×10-3 mg/mL.此外,该方法成本较低且溯源链清晰,可作为一种补充验证方法用于纯品H-FABP标准物质的定值.