학술논문
敲低 m6A 甲基转移酶 WTAP 对皮肤鳞癌细胞 增殖, 迁移,侵袭能力的影响.
Document Type
Article
Source
Subject
Language
Chinese
ISSN
1002-266X
Abstract
目的 通过敲低 N6-甲基腺嘌呤 (m6A) 甲基转移酶 Wilms 肿瘤蛋白 1 相关蛋白 (WTAP) 在皮肤鳞癌 (cSCC) 细胞中的表达, 探讨WTAP对cSCC细胞增殖, 迁移和侵袭能力的影响. 方法 选取人cSCC细胞A431, SCL-1 及正常人表皮角质形成细胞HaCaT, Western blotting法及qRT-PCR法分别检测各细胞中WTAP蛋白及mRNA表达. 选取WTAP蛋白及mRNA表达最高的A431细胞转染WTAP敲低慢病毒shWTAP-1, shWTAP-2, shWTAP-3及阴性对 照慢病毒 shNC, 使用 qRT-PCR与 Western blotting验证转染效率。选取敲低差异最显著的 shWTAP-3转染细胞作为 WTAP敲低组, shNC转染细胞作为对照组。采用比色法检测细胞 m6A表达, CCK-8法及克隆形成实验检测细胞增 殖能力, Transwell实验检测细胞侵袭能力, 细胞划痕实验检测细胞迁移能力. 结果 WTAP敲低组m6A表达低于对 照组, 各时点细胞OD值均低于对照组, 克隆形成数少于对照组, 穿膜细胞数, 细胞迁移率低于对照组 (P均<0. 05). 结论 敲低WTAP可抑制cSCC细胞的增殖, 侵袭和迁移, 该作用可能通过下调m6A表达来实现。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]