학술논문
沉默CTGF对肝星状细胞凋亡及胞外基质表达的影响 / Effects of silencing CTGF on apoptosis and expression of extracelluar matrix proteins in rat hepatic stellate T6 cells
Document Type
Academic Journal
Author
蔡秀华; 董岸莺; 张荣华; 柏干苹; 蒋毅; 陈雪猛; CAI Xiuhua; DONG Anying; ZHANG Ronghua; BAI Ganping; JIANG Yi; CHEN Xuemeng
Source
陆军军医大学学报 / Journal of Army Medical University. 46(2):147-154
Subject
Language
Chinese
ISSN
2097-0927
Abstract
目的 观测沉默结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因对肝星状细胞T6(hepatic stellate cell T6,HSC_T6)的生长与凋亡,以及增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、CTGF、整合素α5(integrin alpha 5,Itgα5)和Ⅰ型胶原(collagenⅠ,ColⅠ)表达的影响.方法 将CTGF-shRNA病毒感染HSC_T6(实验组).空病毒感染的HSC_T6(空病毒组)或未感染的HSC_T6(正常组)作对照.在显微镜下观测被感染HSC_T6的生长与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达变化;采用CCK-8(cell count kit-8))比色检测被感染HSC_T6的增殖情况;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测被感染HSC_T6的凋亡情况.定量PCR、Western blot及免疫荧光细胞化学分别检测PCNA、CTGF、Itgα5和ColⅠ的表达变化.结果 在显微镜下观察到被感染的HSC_T6高表达GFP.CCK-8结果表明,与对照相比,沉默CTGF基因的HSC_T6生长显著受抑,72 h开始其差异具统计学意义(P<0.05).FCM检测结果显示,沉默CTGF基因可诱导HSC_T6凋亡.定量PCR、Western blot及免疫荧光细胞化学结果证实,沉默CTGF基因可在mRNA及蛋白水平明显下调HSC_T6的PCNA、CTGF、Itgα5与ColⅠ的表达,与对照比较,差异均具统计学意义(P<0.05).结论 沉默CTGF基因可下调HSC_T6的PCNA、CTGF、Itgα5及ColⅠ的表达,抑制HSC_T6的生长,诱导HSC_T6凋亡,其机制可能和HSC_T6的CTGF/Itgα5信号通路受阻紧密相关.